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• 發(fā)布時間：2021-03-18 18:00
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【概要描述】近年來,因流感病毒侵害,人類健康和動物產(chǎn)品工業(yè)每年都要蒙受巨大損失。傳統(tǒng)的流感疫苗生產(chǎn)多采用雞胚培養(yǎng)過程,但該生產(chǎn)過程具易受微生物污染、內(nèi)毒素殘余量高、對流感大流行應(yīng)急能力差等缺點(diǎn),因此動物細(xì)胞制病毒疫苗工業(yè)的發(fā)展變得尤為重要。MDCK等細(xì)胞具有培養(yǎng)容易、增殖快、流感病毒感染效率高等特點(diǎn),是適合用作流感病毒疫苗生產(chǎn)的重要細(xì)胞系之一。 本所應(yīng)客戶要求建立了專門的試驗平臺并在王棟老師的指導(dǎo)下初步建立了MDCK懸浮細(xì)胞基礎(chǔ)種子庫和生產(chǎn)細(xì)胞庫。通過長時間試驗，馴化出適應(yīng)無血清懸浮培養(yǎng)的MDCK細(xì)胞。并完成適應(yīng)性傳代實(shí)驗。在此基礎(chǔ)上通過基因改造（插入抗細(xì)胞附著基因和流感病毒受體基因），增加細(xì)胞懸浮培養(yǎng)特性和對禽流感病毒的敏感性，并以之作為載體培養(yǎng)流感病毒，獲得較高的病毒滴度，為開發(fā)和建立MDCK單細(xì)胞無血清懸浮培養(yǎng)體系大規(guī)模生產(chǎn)流感病毒疫苗奠定了基礎(chǔ)。 福爾中生物研究所開發(fā)的MDCK應(yīng)用于大規(guī)模細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)（7L～50L～250L～1000L細(xì)胞罐），具有如下特點(diǎn)（見表1）： 1、細(xì)胞活性高：＞95% 2、密度高：＞9×106cells/ml 3、接毒后獲得的抗原HA滴度高：＞9log2 4、免疫21天HI抗體效價：＞8log2 5、細(xì)胞生長不依賴某一單一的個性化培養(yǎng)基，生產(chǎn)者可以有多種選擇